试剂使用
斐林试剂
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用途:检测还原糖
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成分
- 甲液:$\pu{0.1 g/mL}\space\ce{NaOH(aq)}$
- 乙夜:$\pu{0.05 g/mL}\space \ce{CuSO4(aq)}$
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用法
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甲乙液等量混合
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注入待测组织样液
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$\pu{50 \sim 60 ^\circ C}$ 水浴加热 $\pu{2 min}$
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现象:砖红色沉淀
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苏丹III
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用途:检测脂肪
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用法
- 取材
- 制片
- 染色 $\pu{3 min}$
- 用吸水纸吸去染液
- $50%$ 的酒精洗去浮色
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现象:脂肪被染成橘黄色
双缩脲试剂
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用途:检测蛋白质
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成分
- A液:$\pu{0.1 g/mL}\space\ce{NaOH(aq)}$
- B液:$\pu{0.01 g/mL}\space \ce{CuSO4(aq)}$
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用法
- 将A液与待测组织样液混合
- 加入 $4$ 滴B液
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现象:溶液颜色变为紫色
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原理:在碱性条件下,$\ce{CuSO4}$ 与肽键反应形成络合物(变性、加热后均可)
碘液
- 用途:检测淀粉(多糖)
- 现象:变蓝
碱性染料
- 用途:将细胞核中染色体染色
- 包括
- 甲紫
- 醋酸洋红
酶的活性
- 温度
- 材料
- 淀粉酶溶液 ($\ce{H2O2}$ 加热分解)
- 缓冲液(维持PH $= 7$)
- 可溶性淀粉溶液
- 碘液 (斐林试剂需要水浴加热)
- 步骤
- 将底物与酶分别加热(冷却)至设定温度
- 将底物与酶混合并维持设定温度
- 材料
- PH值
- 材料
- $\ce{H2O2(aq)}$(淀粉在 PH $<7$ 时水解)
- 新鲜的肝脏研磨液
- $\ce{HCl(aq)}$
- 材料
溴麝香草酚蓝溶液
- 与 $\ce{CO2}$ 反应,由蓝色先变绿色再变黄色
- 根据变成黄色的时间,可判断 $\ce{CO2}$ 含量情况
重铬酸钾溶液
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橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇反应,变成灰绿色
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与葡萄糖发生颜色反应(应延长培养时间,尽量耗尽葡萄糖)
绿叶中的色素的提取和分离
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材料
- 新鲜的绿叶
- 无水乙醇(也可以用 $95%$ 的酒精加入适量无水碳酸钠)
- 层析液(有毒)
- 二氧化硅(有助于更充分的研磨)
- 碳酸钙(防止色素被酸破坏)
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步骤
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提取色素
- 绿叶去主叶脉,剪碎
- 加入少许二氧化硅和碳酸钙,再加无水乙醇,迅速充分研磨
- 迅速导入底部为单层尼龙布的漏斗中过滤
- 收集滤液到试管,棉花塞严(色素易挥发,易氧化)
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制备滤纸条
- 将干燥定性试纸剪成宽度略小于试管直径、长度略小于试管的滤纸条
- 在滤纸条端剪去两角
- 在离底部 $\pu{1cm}$ 处铅笔画横线(细、直、齐)
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画滤液细线
- 用毛细吸管(盖玻片)沿铅笔线均匀的画出一条细线。
- 待滤液干后,再重画一到两次
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分离
- 将滤纸条有滤液细线的一端插入有层析液的试管中(滤液细线不触碰层析液)
- 棉花塞紧试管管口
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现象:见光合色素
根尖分生区组织细胞有丝分裂
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材料
- 碱性染料
- 盐酸
- $95%$ 的酒精
- 洋葱根尖分生区
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步骤
- 解离(细胞死亡)
- 材料:盐酸与酒精 $1:1$ 混合溶液
- 目的:用药液使组织中的细胞相互分离开来
- 漂洗:放入清水中,洗去药液,防止解离过度
- 染色
- 制片:按压盖玻片,使细胞分散开来,有利于观察
- 解离(细胞死亡)
观察叶绿体和细胞质流动
材料:藓类叶、菠菜叶、番薯叶、新鲜的黑藻